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用分光光度计测定质粒浓度,按照 浓度×6.02×10^23/质粒分子量的公式来计算标准品拷贝数,这一方法是否正确,请各位指教。谢谢!
我是用TaqMan MGB探针做的定量PCR。 [/b][/font][/color][/size
2011年09月23日发布人:竹蜻蜓
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都在10^6左右。是不是书上给出的数据不准呢?
我现在做绝对定量时是将要扩增的目的片段克隆在T载体上,而后用分光光度计测定质粒浓度,按照 浓度×6.02×10^23/质粒分子量的公式来计算标准品拷贝数,这一方法是否正确,请各位指教。谢谢
2016年01月07日发布人:superboy
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什么跑的电泳?
对质粒跑电泳意义不大,单/双酶切以后电泳更有意义[/color][/size],您的意思是以线性的质粒为准看分子量吗?,看线性质粒长度,或者特定长度酶切片断长度,谢谢您的回答。还想请教一下,我把转化前后的质粒跑电泳比较了一下
2012年05月02日发布人:zwsyrt
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最近在做重组蛋白表达,表达之后也有目的条带,但是就是分子量比理论值要偏大。我的质粒是经过测序的,没有碱基的缺失和突变。另外,我做的是SDS-PAGE.偏大5-50都不等,各位大师帮帮忙,解决下... 着急啊!!!,SDS-PAGE确定的
2016年03月21日发布人:huali
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住1000的,还不能太贵。
谢谢!,应该有,好像我们这里有人买到过!,你1000分子量的物质粒径是多大?,过个凝胶柱不就行了吗?按分子量进行截留的膜我还真没见过!,给打听打听呗,我们这的人都没人用过,网上问了几家也没有,没用过,有点麻烦吧
2011年07月23日发布人:xiaoxin2809
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方法制备得到的已知拷贝数的含有目标片段的核苷酸序列。最常见的是插入有目标序列的质粒,因为质粒是环状DNA有较强的稳定性,而且分子量比较大定量的时候比较准确。也有用线状的PCR产物作为标准品的,通常要比扩增的目标片段要大一些,这也是为了获得分子量比较大的片段,提高拷贝数的准确性。标准品的拷贝数是通
2011年08月24日发布人:白鸟之翼
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用于DNA片段的回收,质粒与外源性DNA的快速连 接等.
(一)凝胶浓度
凝胶浓度的选择依DNA分子的大小而定.琼脂糖凝胶的浓度与DNA分离范围
琼脂糖浓度(%) 线
2011年08月21日发布人:阿拉蕾
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最近做感受态与质粒转化的实验总是长不出菌来。所用的菌是DH-5α,先按步骤制出感受态,接着在4℃冰箱中放12-14小时,再进行质粒转化。所用的标准质粒是6p-1,转化后的菌液是涂布在含有氨苄的平板上,并且设置了阴性对照
2015年01月29日发布人:bluelake
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加上了相同时间的空质粒的对照?
4.你加没加分子量标准?[/color][/size],[size=2][color=Black]
两点,你的宿主菌是不是能够用来诱导表达;OD值其实可以达到0.9左右再诱导,这样可以保证菌的量
2013年04月24日发布人:nut6694
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[size=2]最近做感受态与质粒转化的实验总是长不出菌来。所用的菌是DH-5α,先按步骤制出感受态,接着在4℃冰箱中放12-14小时,再进行质粒转化。所用的标准质粒是6p-1,转化后的菌液是涂布在含有氨苄的平板上,并且设置了阴性对照与
2014年12月06日发布人:yonger