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我有两段基因,分别是1700bp和500bp左右,我希望将两段基因通过中间的重叠互补区域连接,再以此为模板进行PCR,这个是不是就叫融合PCR啊??哪里能找到这样的资料呢??我 扩了好久都没有目的条带,反而有一非
2015年07月02日发布人:zhezhe
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为什么我在做细胞融合时,滴加完PEG,无血甭培养基终止后,会出现小的片状,碎渣子状的东西,是不是杂交瘤细胞与脾细胞破了?而且融合率都不高,大约20-30%,为什么?[/b
2012年02月24日发布人:wmp1234
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个跨膜螺旋,但是使用细胞亚定位(同pEGFPN3融合)发现在细胞核和细胞质中都有表达。
现在望高手参与讨论把:
1.存在跨膜螺旋的蛋白就一定是跨膜蛋白吗?
2.跨膜螺旋的蛋白就一定不能在细胞核和细胞质中表达吗?
3.如何自圆我说
2014年02月08日发布人:applebook=213
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我现在在做一个跨膜蛋白的原核表达,载体是PGEX-4T-2,膜蛋白大小是64KD,菌株:BL21,我改变了诱导时间、诱导温度、诱导剂浓度,但仍然没有表达,测序证实读码框是正确的。 同时空质粒
2013年10月27日发布人:爱老虎游tt
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[color=Black][size=2]大家好。最近我做GST融合蛋白,做了几次表达不出来。
我的目的蛋白36K。连接的重组体已经测序,测序结果没有问题,也已经融合上。 可是,30度,用IPTG1mM诱导4小时,从SDS-PAGE结果
2014年01月09日发布人:jrwyyplt
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我做单抗将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合在HAT培养基下培养,三天后细胞全死了,是什么原因,哪为大虾指点一下,谢谢![/b][/color][/size],[size=2][color
2012年07月30日发布人:toy
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构建了两个融合蛋白表达载体。转染细胞后发现荧光表达上存在有差异,是不是有蛋白定位有关?如果要进一步确定是要做共聚焦显微镜或者其他的吗?[/b][/color][/size
2012年04月06日发布人:彼岸花opp
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[color=Black][size=2][font=Impact]我要纯化的融合蛋白加GST一共100多KD。做了一个多月了还是纯化不出来。给我质粒的那位学者说这种蛋白很容易被水解,诱导表达后跑SDS-PAGE看不出增强带,建议我直接
2014年05月15日发布人:rxcc33
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pet32a到底融合蛋白有多大,前面有his-tag,trx-tag,s-tag共有400多个氨基酸,如果这样算起来应该有40多kd,我的酶切位点前面是bamhi,后面是salI。我的目的条带
2013年06月08日发布人:wu11998866
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大家好,我最近纯化GST融合蛋白,可纯化后融合蛋白很少,杂蛋白却很浓,详见下图。使用的树脂是Pierce Glutathione Agarose,纯化方法是batch method
2013年06月03日发布人:人小鬼大