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个跨膜螺旋,但是使用细胞亚定位(同pEGFPN3融合)发现在细胞核和细胞质中都有表达。
现在望高手参与讨论把:
1.存在跨膜螺旋的蛋白就一定是跨膜蛋白吗?
2.跨膜螺旋的蛋白就一定不能在细胞核和细胞质中表达吗?
3.如何自圆我说
2014年02月08日发布人:applebook=213
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第一次发帖啊,请大家帮帮忙!!
最近在做跨膜蛋白的western,如E-cadherin和N-cadherin等等,如何提取呢?我用的碧云天的RIPA强裂解液,可以吗?抽取
2013年05月16日发布人:cbou876
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我现在在做一个跨膜蛋白的原核表达,载体是PGEX-4T-2,膜蛋白大小是64KD,菌株:BL21,我改变了诱导时间、诱导温度、诱导剂浓度,但仍然没有表达,测序证实读码框是正确的。 同时空质粒
2013年10月27日发布人:爱老虎游tt
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配方,把脱氧胆酸钠浓度调整至1.0%,同时加入NP-40和Triton X-100,浓度均为1%。我刚做了一个7次跨膜蛋白,LHR的WB。[/color][/size],[size=2][color=Black]
前些天用凯基的膜蛋白提取
2017年08月16日发布人:minran_1980
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发粘了,提取跨膜蛋白(能尽量保留生物活性的)可以用以下试剂盒 [/color][/size],[size=2][color=Black]
蛋白浓度太高了,增加裂解液的量,同时可以用超声碎裂器碎裂,如果没有这个可以把加裂解液的细胞悬液放在六孔
2013年08月09日发布人:koook5695
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好多条表达带,仅仅绿色箭头对应的条带 与预测蛋白分子量大小相等。
我表达的是某细菌一跨膜蛋白,跨膜两次。[/font][/size][/color],别的不一定是表达的,你上样量不同所以看起来比对照浓,[quote]原帖由 [i]人小鬼大
2013年12月23日发布人:人小鬼大
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[size=2][color=Black]本人要用重组蛋白为抗原免疫动物做抗体,因为我的蛋白是人的跨膜蛋白,而重组跨膜蛋白好像和重组可溶性蛋白有区别,更有难度。现请教各位几个问题,望帮忙解答(对这方面不太懂,可能问题有些傻,望理解
2013年12月16日发布人:kuaizige
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),这还需破壁,此外某些跨膜蛋白质也存在于细胞培养液的上清中。所以是否细胞培养液的上清能做WESTERN主要根据蛋白特性。可以检测到的蛋白的量也要根据蛋白特性和培养条件而定。一般不需要特殊处理,要处理也主要是防止蛋白的降解。是否需要浓缩主要根据蛋白的表达量而定,如果不浓缩,蛋白表达量少的就不容易出结果。不知我是否解
2014年07月05日发布人:niangao1980
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有没有人做过IP七跨膜蛋白?我试了几次,都失败了.
请问有没有比较好的protocol[/font][/color][/size],[size=2][color=Black
2014年02月12日发布人:mod=8048
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裂解液裂解细胞[/font][/color][/size],[color=Black][size=2]ok,注意裂解液不要加太多,蛋白浓度太低就不好办了!![/size][/color],[size=2][color=Black]请教跨
2014年05月06日发布人:vcve