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一直以为小肽就要用专门的Tricine胶,在普通的SDS-PAGE上应该是跑不出来的才是,这似乎是理所当然的事情。
但是最近做实验时发现,把20K的蛋白酶切后用15%的胶跑,Biorad的
2014年02月03日发布人:any333
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已经考虑了"山百合"战友所提到的因素,前天重新做的酶切,昨天跑胶发现载体带和目的片段带都很清晰,并没有发现质粒丢失的情况.今天已经重新做了转化,准备重新挑菌再诱导,还不知结果会怎样![/color][/size],[size=2][color=Sienna]同情你老兄,我也是遇到类似问
2014年05月31日发布人:sistis
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[size=3][font=楷体_GB2312][color=Black][b][精华]酶切问题讨论专栏 [转载]
如何选择酶切缓冲液,如何提高酶切效率,尤其是PCR产物的酶切、双酶切、特殊酶切,总结了以下几点,希望对大家
2011年10月07日发布人:3N4G
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电泳中,因为各自残基和一定空间结构的差异,是很难真的100%重叠[/color][/size],[size=2][color=Black]这么快,目的是27,gst26,总大小是53呀!酶切后跑12%的胶,看不出明显的差异!考虑用离子交换
2014年01月07日发布人:简森si
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请问用凝血酶thrombin酶切gst蛋白时,采用bovine小牛规格的酶可以吗?纯度为77%,但稀释跑胶发现有多条杂带。是否有必要用专门的restriction级别的,谢谢
另外,酶切时
2014年06月28日发布人:newway
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cds(从ATG开头到终止密码子)。然后选用新买的pET28a作为载体,设计引物,pcr扩增,跑胶验证都正确。pcr产物纯化(kit),酶切(目的片段、载体),酶切纯化(kit),T4连接酶 16度过夜,取10μL连接产物转DH5a感受态
2013年11月09日发布人:luoliqiong
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你上多少样啊?[/size],[size=2]
片段多了后面的连接,酶切才好做,尽量提高片段的量,EB染色至少能够看到明显的条带,胶回收也不是100%回收的,效率取决于片段的大小,量,用的回收柱子
2015年02月13日发布人:dior
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请大家帮我分析一下:
我双酶切重组质粒,经电泳检测已经切出来了,然后割胶回收,跑大孔胶后(加了70ul样),经紫外透射仪检测,目的条带很淡,几乎看不到,试剂盒回收什么也没有,做了
2014年04月12日发布人:04906
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我想对PCR产物分析一下,全部测序太贵了,不知道PCR产物是否可以直接酶切,需要注意些什么问题。谁有没有比较好PCR产物直接酶切的protocol呢,请给我传一个,本人不胜感激![/font
2015年12月04日发布人:铜雀
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[size=4][color=Black][b]求助:PCR产物是否可以直接酶切呢 [转载]
我想对PCR产物分析一下,全部测序太贵了,不知道PCR产物是否可以直接酶切,需要注意些什么问题。谁有没有比较好PCR产物直接酶切的
2011年10月04日发布人:芙蓉宫主