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[size=2][font=黑体]问答如题。
之前曾经扩增出来目的片段多次,后来cDNA用完,又换了新的cDNA,结果重复多次出现这样的条带,在加样孔边上,跑不下来。
用的Pfu。pcr条件为 95度 30s, 63度30s 68度
2015年03月10日发布人:ukonptp
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问题是,扩增出来的总是只有1KB,换了好几对引物,差不多都是如此,不过有一次得到所需片段,但没有重复性.各位高手解释一下,看能不能想出什么好的解决办法.
不胜感激![/font][/color][/size],[size=4]能否将你的情况
2011年10月08日发布人:caihong
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[size=2]前6个是别的实验,后面的条带是我做菌液pcr时跑出来的带,为什么有那么多重复的带?目标片段是1000bp的,之前做出来一次,用的是同样的程序,体系也没有变,为什么会出现这样的情况?跪求高手指点![/size],[size
2015年03月10日发布人:王蜜蜜
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[color=DarkRed][size=5][font=宋体][b]长片段RT--PCR的可重复性是100%吗?[转自 丁香园论坛]
that is to say,相同的条件下,每次都可以得到相同的条带吗?还是具有偶然性?静侯
2011年09月05日发布人:she
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重复使用,但是原来未稀释前在-20度时抗体不结冰,现在稀释后则结冰,这样用时反复冻融会不会影响结果。还是抗体在稀释后应放4度保存?
另外我想问一下这样的抗体一般可用几次。
如果是在室温下孵育的抗体可不可以重复用,上次我用此抗体,连原来做出来的
2014年03月10日发布人:yjf1026
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[font=楷体_GB2312][/font][color=Black][size=4]请问长片段反转录PCR可行吗? [转载]
我要从总RNA中反转录出大小约6kb的片段,不知道是否可行?
还有如果可行,要注意哪些事项
2011年09月15日发布人:babybabe
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[color=Black][size=2]
最近做HIV蛋白片段的时候,发现有些蛋白片段对抗原的活性影响很大,有时候会使目的片段失去活性。融合蛋白片段是相对比较惰性的片段,怎么会有这么大的影响呢?蛋白片段对目的片段有怎么样的影响呢
2013年12月23日发布人:@STAR@
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我现在实验得到一条平末端的片段,用实验室加A的办法连接载体的效率很不好,怀疑是加A效率不高,请问大家在试验中有什么加A效率高的好方法吗?谢谢,我们的加A的体系是10ul的体系
H2O X
2009年10月13日发布人:gousheng1984
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GB 601中规定:滴定标准溶液单人4平行与2人8平行的极差不得大于重复性临界极差相对值的0.15%和0.18%
可是重复性临界极差相对值的0.15%和0.18%计算出来之后远远小于极差的相对值,不知道各位怎么算的?,这个标准的意思是
2013年04月28日发布人:mico_11
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切条件,只偶尔能看到目的片段,而且量非常少,跟GST标签不成比例(根据大小比较)。有哪位指点一下。
注:融合蛋白放久了也发现降解的只剩下标签蛋白了,难道我碰上超级不稳定的蛋白了么。。。。。。[/font][/color][/size
2013年05月31日发布人:nvdabing