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][/size][/color],[color=DarkRed][size=4][font=楷体_GB2312][b]如果没有把握,可以寻找目的片段内的天然酶切位点。
分段扩增,然后酶切连接也是一种办法,用这种办法理论上可以解决无限长的目的片段。 [/b][/font][/size][/color],[color=Black][size=3]我要连
2011年09月15日发布人:babybabe
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T载的通用引物进行高通量测序是否可行呢?,你DNA片段大约多少?几千?还是几百万?
测了对你帮助大不大?预算多少?,可以测啊 问题是你测序了是干什么用的? 500-1000肯定要打断的 现在的高通量测不了这么长的片段,大概有几百个
2015年10月25日发布人:qinqinai
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回收,用胶回收试剂盒,这样量和纯度都解决。片段大小不是问题,80的我做过,5k的也做过。[/size],我的是长引物,片段本来就不好扩。跑出的PCR产物量本来就不多,条带很暗,引物二聚体很亮。正因为我的产物很少,再用胶回收就更少了,我也试过。所以想用酒精沉淀法做做,[size=2]
PCR产物不多,条
2015年02月16日发布人:7437654
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想问下用takara ex taq酶的坛友们最长扩出多长的片段,正在扩一个3500左右的片段,不知道行不行[/size],[size=2]
我用过,但是你扩这么长的片段有危险,你试试看,如果不行的话,TAKARA还有
2015年03月10日发布人:toy
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可不可行。原则上,标准品的片段要比目的片段稍长。但是没有办法,由于经费问题,不可能合成多对引物。注:普通PCR与荧光定量PCR所用的引物相同。
请大家给点意见,不知道这样的设想可行否?谢谢![/size],[size=2]
思路上是对头的
2015年12月04日发布人:bgf5
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[size=3][font=仿宋_GB2312][color=Black][b]长PCR疑难问题
我第一次做PCR,欲扩增一条长四千bp片段,模板来自小鼠胚胎干细胞基因组DNA,一对引物分别为:正向5'-CGG AAA TGG
2011年10月04日发布人:98776langtao
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[size=2][font=Verdana]今天跑的pcr,同一个基因,设计了两对引物,marker后1~3是800bp长的片段,4~5是600bp才片段,最后一个是阳性对照。
1~3的引物退火温度是55℃左右,引物报告单上是57.3
2015年01月13日发布人:yyaxw84
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推荐也可以试一下takara的LA-TAQ酶,可以做的片段更长,按公司的说法,是超长片段更准一些.extag虽然呆以扩长段,但我认为不宜如说明上介绍的10K以上扩增采用,但这个酶是个扩增效率较好的酶.楼主的片段不长,可以试用这两个,各有优点
2011年10月20日发布人:JK.jon
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[font=仿宋_GB2312][color=DarkGreen][size=4][求助]如何分离134bp和156bp俩个片段?
我从白细胞中提取DNA,进行PCR扩增后须电泳分离134bp和156bp俩个片段,我的胶大约12
2011年10月20日发布人:987789
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:95度60秒,95度15秒,60度15秒,72度45秒,共40个循环。实验结果很怪:熔解曲线出现一个倒峰(见附件)。我不知是不是片段有点长,72度延伸时间太短所致。[/b][/font][/size][/color],的确比较奇怪。你倒是
2011年08月19日发布人:冷太阳