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最近在做原核表达,包涵体。以前也做过,但经验不多。从园子里也学到不少。一点失败的教训以及纯化过程中的体会,贴出来与大家共享,同时希望得到同行们的指正
1. 首先介绍一下背景
2013年04月20日发布人:ukonptp
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一般现在选购带石墨炉的原吸时,大部分人都不太推荐国产石墨炉,认为国产石墨炉技术与进口石墨炉技术还有一定差距。
国产原吸石墨炉与进口原吸石墨炉到底差距在哪里?,二者主要是在机械精密加工工艺和电子电路的控制精度上的差别。,除了机械与电子
2016年04月26日发布人:iop
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我现在在做PGEX-4T-2的原核蛋白表达和纯化。通过SDS-PAGE证实已经有融合蛋白的表达。下一步我想进一步做蛋白大量表达以及纯化,用于以后的活性检测和动物实验。但不知该如何操作
2013年06月29日发布人:mingming0638
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小生作一新分子的原核表达,预测分子量9.0 KDa左右,载体是pGEX-2T,GST融合载体,测序也正确,试过37度,30度,28度,IPTG 0.4-1.0mM,都不表达
2013年07月30日发布人:嗅嗅
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我现在在做一个跨膜蛋白的原核表达,载体是PGEX-4T-2,膜蛋白大小是64KD,菌株:BL21,我改变了诱导时间、诱导温度、诱导剂浓度,但仍然没有表达,测序证实读码框是正确的。 同时空质粒
2013年10月27日发布人:爱老虎游tt
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原吸用冷却循环水机,你加什么水,多长时间更换呢?
其中有讲究的哦,欢迎讨论!,蒸馏水吧,直接加自来水也行。,为了安全还是用蒸馏水吧。,用的蒸馏水,还要加防冻液!,我们用蒸馏水.,蒸馏水,仪器上的冷却水最好别直接用自来水,造成循环管路堵塞
2016年02月19日发布人:jiushi
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小弟在做原核表达。用的是pet-28a和BL21(DE3)。OD0.5-0.6时开始诱导,IPTG浓度有1mM 0.5mM 0.1mM 0.05mM 0.01mM,诱导温度有37度,30
2013年04月24日发布人:star#room
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我的实验内容是:诱导原核表达,重组质粒我已经构建好了,载体是PQE30,插入片段约1200bp,菌株是BL21。用IPTG诱导表达。考马斯亮蓝染色,WESTERN-BLOT鉴定。
我现在遇到
2014年04月19日发布人:one
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你的原吸是否装杀毒软件?是否定期杀毒?,当然没有装,因为杀毒软件会破坏工作软件嘛,我们也没有装。,这么肯定吗,俺只能说,这话是工程师还有本单位一位电脑方面的大拿同事说的,对于这一点,我表示肯定一定和确定,我们装了杀毒软件,我们未装杀毒软件
2015年08月23日发布人:风往尘香
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[size=2][color=Black][font=黑体]小生作一新分子的原核表达,预测分子量9.0 KDa左右,载体是pGEX-2T,GST融合载体,测序也正确,试过37度,30度,28度,IPTG 0.4-1.0mM,都不表达,连
2013年11月17日发布人:羊咩咩