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,显微镜下尽量去除胆管和血管,剪碎肝组织[/size],[size=2]
将搅碎的肝组织倒入50 ml的离心管,加入solutionII至30ml,加入胶原酶,pronase和DNase,37度水浴消化12 min。(如果前面的灌注不好的话
2015年08月10日发布人:箭头儿
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,肝脏上可见白色纹理)。 [/color][/size],[size=2][color=Black]灌流结束,将肝脏移至培养皿中,加入少量(5ml左右)solutionII,显微镜下尽量去除胆管和血管,剪碎肝组织 [/color][/size
2012年05月19日发布人:fsdd817
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[size=2][color=Black][b]
我刚分离的肝星状细胞,两天后还是圆形的,仅有几个细胞转变成星型,细胞数量较少,不知大约多长时间多数细胞才能转变星型[/b][/color][/size],[size=2][color
2012年09月13日发布人:guagua
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的时候,肝脏上可见白色纹理)。 [/color][/size],[size=2][color=Black]
灌流结束,将肝脏移至培养皿中,加入少量(5ml左右)solutionII,显微镜下尽量去除胆管和血管,剪碎肝组织
2012年03月20日发布人:乌贼老弟
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[size=2][color=Black][b]
我做的是大鼠延髓组织冰冻切片,厚15微米,免疫组化实验。片子经铬钒明胶处理,在3%双氧水浸泡,加一抗和二抗及冲洗和脱水的过程中就会出现脱片现象,谢谢交流指点![/b
2012年03月13日发布人:一叶
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[size=3][font=仿宋_GB2312][讨论帖]肝星状细胞原代培养方法及trouble-shooting
由于近期收到一些群友们关于肝星状细胞的pm. 特发此贴, 便于大家讨论及学习. 谢谢
请参考下面2个帖子
2011年12月16日发布人:@STAR@
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%C7%D7%B4%CF%B8%B0%FB+DMEM[/url]
这个是详细的大鼠方法,供参考
2. 【求助】肝星状细胞 (RAT)
[url]http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post
2012年05月19日发布人:gmjghh
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是用PBS溶解的,请问你自己制备微粒体吗?我的组织匀浆液(每克肝组织加上4倍的匀浆缓冲液)接近肉色(淡白色),超速离心后(10500g,70min)后,得到的上清也是有点红的颜色,弃上清,沉淀(肝微粒体,得到的颜色比较深,有点接近深红)用
2014年10月31日发布人:changlhsyo
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[size=2][color=Black][b]我现在正从大鼠肝脏分离肝星状细胞进行培养,遇到一些问题,特地请教各位行家,希望能得到指导:
1.分离肝星状细胞时用的是Nycodenz分离液,11%的终浓度,1400g,17分钟,但分离
2012年09月29日发布人:2541
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],[size=2]实验室里NAPDH是用PBS溶解的,请问你自己制备微粒体吗?我的组织匀浆液(每克肝组织加上4倍的匀浆缓冲液)接近肉色(淡白色),超速离心后(10500g,70min)后,得到的上清也是有点红的颜色,弃上清,沉淀(肝微粒体,得到的颜色
2014年12月02日发布人:园丁##