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western 印迹(western blotting
加10 ?l PMSF(100mM),摇匀置于冰上。(PMSF要摇匀至无结晶时才可与裂解液混合。)4、每瓶细胞加400 ?l含PMSF的裂解液,于冰上裂解30min,为使细胞充分裂解培养瓶要经常
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Co-IP
,不要加去氧胆酸钠,因为离子型去污剂能够使酶变性,导致活性丧失。RIPA蛋白酶抑制剂: 苯甲基磺酰氟(PMSF):用异丙醇配制成200mM的储存液,室温保存。EDTA: 钙螯合剂
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酪蛋白酶谱法MMP3/7/10检测实验服务
天。 2)组织样本准备:取100mg新鲜组织以2ml匀浆液进行匀浆(匀浆剂:0.1M Tris/ HCl/pH 7.4 ,0.5% TritonX-100,0.1mg/ml PMSF),12000g
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小美超微量超声波细胞破碎仪破碎微囊藻实验
PMSF(100mM),超声处理。超声后,4度离心,取上清转移至新的离心管,用于蛋白定量和抗氧化酶活性检测。 注意: 1、每次破碎样品时尽量避免探头贴壁,也可根据客户自己操作调节 2
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原代细胞分离培养鉴定以及检测等整体课题服务
1、实验材料 PBS、细胞裂解液、PMSF、BCA试剂盒(嘉美生物)、5×蛋白上样缓冲液、脱脂奶粉,CaMK-Ⅱδ一抗(Abbioscience)、B蛋白一抗(Abbioscience
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Western Blotting
μl上样Buffer(无溴酚蓝)和100ul 10mg/ml PMSF,混匀,玻璃匀浆器冰点匀浆2)4℃,12000rpm离心10min3)取上清夜-70℃冻存24hr5)4℃12000rpm再次离心
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免疫沉淀
加入500μl上样Buffer(无溴酚蓝)和50ul 10mg/ml PMSF,混匀,超声波破碎细胞2)4℃,12000rpm离心10min3)取上清夜,-70℃冻存24hr5)4℃ 12000rpm
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WB检测
上样Buffer(无溴酚蓝)和100ul 10mg/ml PMSF,混匀,玻璃匀浆器冰点匀浆2)4℃,12000rpm离心10min3)取上清夜-70℃冻存24hr5)4℃12000rpm再次离心
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免疫共沉淀实验技术(IP
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Utra-pureTaqDNAPolymerase(10×TaqBuffer含有Mg2
YM-MY543J WB洗涤液(10×) 100ml YM-MY544J 10×丽春红染色液 10ml YM-MY545J PMSF() 10ml YM-MY546J SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
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