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cycle。4、94度30秒,68度30秒,72度3分钟,25cycle。最后,72度7min延伸。(这个是BD公司提供的程序)
做第一轮pcr的时候有条带,但是鉴定不是我要的。第二轮pcr的时候好像隐约有目的条带,但是不亮,很微弱。对了
2015年08月05日发布人:月牙牙
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[size=3][color=Black][b]
我想问一下做过这方面实验的学长和老师,转染后第一轮是不是一定要等14天(还是有病变就能收?),第一轮第二轮第三轮细胞若有病变应该是什么样,(能不能发张图),我是将细胞十天后直接冻
2012年05月19日发布人:BUK
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[size=2]
哪位大侠能提供比较详细的介绍巢式PCR的文献和资料呀,
有经验之谈更好,多谢![/size],[size=2]巢式PCR和普通PCR在反应原理上是相同的 不同之处在于 巢式PCR第二轮的模板不是全部CDNA 而是
2015年08月05日发布人:西子
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[size=2]第一轮pcr条带不是很亮,又做了以第一轮为模板做了一轮巢式PCR,结果跑电泳跑的拖尾 条带在最顶端。
第一轮循环数34,以cDNA为底物,加2ul
第二轮循环数30,以第一轮产物为底物,加2ul[/size
2015年02月14日发布人:chenshuanhe
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产物、第二轮PCR产物电泳图(100BP参照,第一轮产物应为290BP,第二轮大小应为173),[img][/img]求教我的结果是阳性吗?不好的原因是什么?可采取那些方法? [/color][/size][/font],[size=4
2011年10月24日发布人:PINK
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[size=2][font=黑体]
我正在做巢式pcr,第一轮扩增时产物很好,我直接用第一轮的产物做模版进行第二轮扩增,结果第二轮扩增时出现很多杂带,我在想提高退火温度能不能减少杂带[/font][/size],[size=2]你怎么
2014年12月01日发布人:kswl870
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[size=2]做支原体检测的第二轮电泳图,条带大小应该在200bp~300bp之间。可是现在跑成了这鬼样,不知道是什么情况,求解。左边是3000的marker,右边是1500的marker。求。。。。。。。。。解。。。。。[/size
2015年03月10日发布人:popo520
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[size=2][b]
我做的巢式pcr,这是第二轮电泳结果。左起第一条泳道是maker 从下到上分别是100bp,250,500,750,1000bp,然后其他的目的样应该是300bp左右,前四个目的样条带特异性不好,我退火已经
2014年10月25日发布人:bs4665
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)
Primer2 1.6ul (终浓度:0.4mM)
Taq酶 2U
模板用的是2ug
第一轮扩增循环是:95度预变性5分钟,94度1分钟、54度1分钟、72度1分 钟,共30个循环,最后一个循环延伸时间为8分钟。
第二轮
2011年10月19日发布人:bs4665
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],[size=2]
这个没有关系的,只要第二对引物在第一对引物的内部就好[/size],[size=2]
两次产物的差异没有影响,只要第二轮引物位于第一轮内部就好[/size],[size=2]
这个看你实验需要,以及你方便设置引物即可,总的
2014年10月07日发布人:boom